鲎试剂,全称鲎阿米巴样细胞溶解物(Limulus amebocyte lysate),缩写LAL,是一种来自鲎血液中阿米巴样细胞(英语:Amebocyte)的细菌内毒素脂多糖(LPS)检测试剂,广泛应用于革兰氏阴性菌内毒素的检测和定量。
麦克林内毒素检测(鲎试剂)产品具有纯度高、生产工艺先进、接受研发定制等特点,能被广泛适用于各类科研项目、研究实验中,欢迎选购。
本文通过以下几点介绍麦克林内毒检测鲎试剂的反应机理及相关产品等:
1.历史与采集制作
2.使用方法
3.反应原理
4.重组因子C
5.鲎试剂的分类
6.存储方法
7.麦克林内毒检测鲎试剂产品介绍
历史与采集制作
1956年Fred Bang发现灭活的革兰氏阴性菌也能引起鲎的血液转为半凝固状态,之后发现了其中的阿米巴样细胞(Amebocyte),并将其开发成为了检测外毒素的试剂。
鲎每隔一年都会上岸产卵,试剂厂商定点进行抓捕,经心包放血后再放生,血液经过离心机处理,将细胞和血浆分开。细胞放入蒸馏水会胀破,释放出“细胞溶解物”。溶解物经过冻干处理,即制成鲎试剂。
使用方法
鲎试剂有三种用法:凝胶法、比浊法、比色法。鲎试剂一般用于各种非消化道给药和接触血液或脑脊液的药物、仪器的测试,保证其不受内毒素污染。
鲎试剂也会被(1,3)-β-D-葡聚糖触发。这种葡聚糖和LPS一样,也是一种病原相关分子模式。
在药品开发过程中,处理干扰鲎试剂(造成虚高或虚低结果)的各种物质为较为耗时的一步。在使用鲎试剂测试前,必须要进行干扰试验,并证明可以达到正确结果。
反应原理
鲎的循环系统为开放式,血液会和所有组织液体混合,因此感染风险较大。因此,鲎进化出了一套血液凝固的系统,用于阻止细菌侵犯。在鲎和鲎试剂中,凝血信号通过一种级联/瀑布(cascade)系统逐步触发放大。LPS首先激活蛋白酶鲎因子C,使其可以切除抑制单元,从而激活同样为蛋白酶的鲎因子B。鲎因子B进而激活鲎凝血酶,而鲎凝血酶会部分消化凝固蛋白原(英语:coagulin),生成会自动聚合成凝胶的凝固蛋白。(1,3)-β-D-葡聚糖导致凝结的通路稍有不同,是通过鲎因子G激活鲎凝血酶。
重组因子C
由于采集过程对鲎不利,并且在一些采集点鲎数量不停减少,人们开始转向通过合成技术生产鲎试剂的替代品。重组因子C(rFC)这种试剂于2003年推出,是各种鲎因子C的重组蛋白质版本,经过昆虫细胞等其他生物表达产生。
重组因子C试剂不是通过造成凝胶显示结果,而是通过荧光显示结果。试剂内含有因子C和一小段结构类似因子B的荧光原。在因子C被LPS激活后,荧光原会被切开释放荧光剂,让实验者看到。因为重组试剂不含因子G,所以不会对(1,3)-β-D-葡聚糖造成假阳性反应。
鲎试剂的分类
普通鲎试剂:灵敏度0.5~0.125EU/ml,适用于仅需要检测内毒素限量的样品。
高灵敏度鲎试剂:灵敏度0.06~0.015 EU/ml,适用于内毒素限量较低的样品细菌内毒素检查。
特异性鲎试剂:灵敏度0.5~0.015EU/ml,适用于成分较为复杂,会对鲎试剂产生干扰的样品。
定量法鲎试剂:最低检测限0.03~0.005 EU/ml,适用于需要对内毒素进行定量测定的样品。
存储方法
虽然冻干的鲎试剂在常温条件下是相对稳定的,但还是应存放在2℃~8℃下,避免长时间放置在高于25℃的温度条件下导致因贮藏不当、质量下降而引起的检验误差。
麦克林内毒检测鲎试产品介绍
麦克林内毒检测鲎试剂产品优势:
1.结构新颖、品种繁多
2.纯度等级高
3.生产工艺先进
4.接受研发定制
货号 | 产品名称 | CAS号 |
E861504 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度0.03EU/ml | - |
E861505 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度0.06EU/ml | - |
E861506 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度0.125EU/ml | - |
E861507 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度0.25EU/ml | - |
E861508 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度1EU/ml | - |
E861509 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度2EU/ml | - |
E824212 | 凝胶法鲎试剂, 灵敏度0.5EU/ml | - |
E861510 | 特异性凝胶鲎试剂, 灵敏度0.125EU/ml | - |
E861511 | 特异性凝胶鲎试剂, 灵敏度0.25EU/ml | - |
E861512 | 特异性凝胶鲎试剂, 灵敏度0.5EU/ml | - |
T916685 | 特异性凝胶鲎试剂, 灵敏度0.03EU/ml | - |
E916686 | 特异性凝胶鲎试剂, 灵敏度0.06EU/ml | - |
麦克林是内毒检测鲎试剂大规模生产商,我们针对生产和生化技术客户提供定制配方制剂
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